Absorbance

L’absorbance quantifie, sur une échelle logarithmique, l’atténuation d’un rayonnement traversant un échantillon. L’absorbance décadique s’écrit A = log10(P0/P), où P0 est la puissance radiante incidente et P la puissance transmise après correction du dispositif. C’est une grandeur sans dimension, mesurée à une longueur d’onde et avec un trajet optique déterminés.

Relation avec la transmission

Une absorbance nulle correspond idéalement à une transmission complète. Une absorbance de 1 correspond à une transmission de 10 %, et une absorbance de 2 à 1 %. Cette relation logarithmique distingue l’absorbance de la fraction de lumière absorbée. La diffusion par des particules, les réflexions aux parois et la luminescence peuvent aussi diminuer ou augmenter le signal détecté sans constituer une absorption moléculaire pure.

Dans les conditions de la loi de Beer-Lambert, l’absorbance d’une solution homogène contenant une seule espèce absorbante est proportionnelle à sa concentration et à la longueur du trajet optique. La proportionnalité se dégrade notamment à forte concentration, en présence de réactions chimiques, de lumière parasite, d’une bande spectrale trop large ou d’un échantillon trouble.

Usage analytique

Les tests colorimétriques transforment souvent l’analyte en composé coloré puis relient son absorbance à une concentration au moyen d’un étalonnage. Un blanc corrige l’absorption du solvant, des réactifs et de la cuve. La longueur d’onde, le type de cuve, le trajet optique et la gamme d’étalonnage font partie de la mesure ; deux valeurs obtenues dans des conditions différentes ne sont pas directement comparables. En colorimétrie de l’eau, la turbidité et la couleur naturelle constituent des interférences fréquentes.