PCR multiplex
Une PCR multiplex amplifie plusieurs cibles génétiques dans une même réaction grâce à plusieurs couples d’amorces, et éventuellement plusieurs sondes. Elle peut rechercher plusieurs agents ou associer une cible diagnostique à un contrôle interne.
Validation
Les amorces peuvent entrer en compétition ou former des produits non souhaités. Chaque cible est donc évaluée seule puis en combinaison pour la spécificité, la limite de détection et l’efficacité. Un signal dominant ne doit pas masquer une cible faiblement abondante.
En diagnostic moléculaire, la réduction du volume et du temps ne dispense pas de témoins d’extraction, d’amplification et d’inhibition. Une PCR quantitative multiplex doit distinguer clairement les canaux et vérifier l’absence de recouvrement. Les performances sont établies dans la matrice et la population d’usage, pas seulement sur de l’ADN pur.