RT-qPCR
La RT-qPCR associe une transcription inverse, qui convertit l’ARN en ADN complémentaire, à une PCR quantitative. Elle est utilisée pour détecter des virus à ARN ou mesurer l’expression de gènes.
Points critiques
L’ARN est sensible à la dégradation ; prélèvement, stabilisation et extraction sont déterminants. Un contrôle sans transcriptase peut révéler une contamination par ADN. Les témoins négatifs, positifs et d’inhibition, ainsi que l’efficacité de la transcription inverse, sont documentés.
Le signal indique la présence d’une cible ARN, pas nécessairement celle d’un virus infectieux. Pour l’expression génique, les gènes de référence doivent être validés dans les conditions étudiées. La notation RT-qPCR évite la confusion entre « RT » pour transcription inverse et « temps réel ».